Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者实质性缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现去甲自身HIV到显现1标准型癌症诊断患者的方面率在儿童时期就有很好的描述，多个去甲自身HIV无患者的儿童之记事70%在血清转换后10年末患上癌症，而随访15年的儿童这一%减低到84%。相比之下，%诊断1标准型癌症一半以上的标准型1标准型癌症的确诊机制还无法给予充分的深入研究。

越发多的人开始用于应于系统来定义1标准型癌症的方面：形态在显现多种去甲自身HIV时进入第1过渡期，显现血糖异常时进入第2过渡期，显现患者时进入第3过渡期。一些多发去甲自身HIV无患者的形态，在1期和2期，方面慢，并转变为确诊的1标准型癌症。我们之前描述了四四组在首次检测到多种去甲自身HIV结果标示出有后非常少10年无癌症的极慢方面者，这四组病症人数少，但外观上非常明确。随后，我们发现去甲自身蛋白特异性CD8+T线粒质反不应在方面加速的病症之中基本不存有，但在现阶段确诊和曾一度存有的癌症病症之中很容易检测到。这可能表明，与方面病症相比，这些病症自身免疫反不应的诱导增强。

早期深入研究表明，尽管诱导性T线粒质(Treg)数量正常，但癌症病症存有一些机能缺陷，其之中以外对IL-2的反不应意志力降低。此外，癌症病症之中的效不应CD4+T线粒质可能对诱导非常具抵抗性，表现为效不应T线粒质的诱导西移动，自然产生的Treg和质外产生的正向Treg，以及蛋白经历的CD4+T线粒质之中IL-2反不应西移动。本深入研究的借此是描述了CD4+诱导性T线粒质(Treg)在一小群极加速方面者之中的外观上，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX深入研究是一项以成年人为了将的纵向深入研究，在21岁下述确诊的病症亲属之中检查1标准型癌症的危险因素。我们之前描述了曾一度加速方面者的外观上，他们持续保持多重去甲自身HIV无患者高达10年，但无法显现癌症的诊断患者，慢性或非展开性自身免疫。随后，10名继续持续保持无癌症并愿意提供大量血液结果标示出有的加速方面者纳入T和B线粒质机能比对。在现有的深入研究之中，8名慢方面者(SP四组)，之中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的去甲自身HIV无患者。所有的自发性都处于1标准型癌症方面的1期，尽管一些人随后失去了去甲自身HIV对某些蛋白的无患者反不应，然而，一名病症已经处于2期非常少6年，但无法显现诊断患者，一名病症被诊断为癌症，该受试者72岁，在采集物理结果标示出有时，其HbA1c消退到53 mmol/mol(7%)，在数据比对之中对该酪氨酸展开了单独评量。分离外周血单个核线粒质(PBMCs)，有别于多数值流式线粒质拳法和T线粒质诱导试验评量酪氨酸之中Treg的高频率、表标准型和机能。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和回归)展开无监理聚类比对，评量Treg表标准型。

结果：与肥胖症酪氨酸相比，来自慢方面质的遗忘CD4+T线粒质的监理聚类标示出有，诱导的遗忘CD4+ Treg高频率减低，与糖皮质激素正向的TNFR相关蛋白(GITR)隐含减低有关。一名HbA1c消退的病症与方面加速者和比如说的对照四组相比，Treg谱有所不同。机能比对表明，与肥胖症酪氨酸相比，来自加速方面质的Treg介导的CD4+效不应T线粒质诱导轻微毁坏。表现为对效不应CD4+T线粒质CD25和CD134隐含的诱导减低。

示意图1 险恶的表标准型比对标示出有，CD4+Treg亚标准型在慢方面队列之中减低。由FlowSOM生成的Treg室，涌进在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -线粒质上。根据上面物隐含鉴定出有10个元簇:遗忘T线粒质_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T线粒质;HLA-DR + GITR +遗忘T线粒质;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)用于9个不同Treg上面生成的10个元簇的MST。每个终端象征性一个战斗群(100个战斗群)，非常大的元战斗群(10个元战斗群)在终端四组周围装裱。每个终端之中的饼示意图坚称单个上面的隐含级别。(b)每个元聚类的热示意图，以标示出有连续性上面隐含。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成示意图，以及FlowSOM辨识的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对丰度为每个metacluster木箱直通示意图(丰度> 0.05%)确定为HD和SP四组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T线粒质(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T线粒质(l)。红色带子象征性捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon以此类推大写字母秩检测。此键适用于示意图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

示意图2 用于CITRUS的预测模标准型证实，Treg高频率的减低是方面加速的标志。国际标准门控(a - f)和柑橘比对(g-k)比较SP自发性和比如说的HD自发性在CD4+CD45RA−T线粒质上的差别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群质的传奇色彩示意图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含展开分离，模拟FlowSOM群质。(b) HD(黑点)和SP(白斑)四组以及酪氨酸SP 606(红色)之中CD25+ cd127的高频率综合示意图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的木箱直通示意图;(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度着色，箭头突出有的簇被辨识为SP和HD队列两者之间的不同。(j)木箱直通示意图标示出有了在SP(白斑)和HD(灰点)四组之中，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相对丰度(%)。(k)直方示意图标示出有每个簇的表标准型(红色)和Treg上面相对隐含与或多或少隐含(紫色);上列，磁盘Treg_3;下面一行，磁盘Treg_4。或多或少与所有其他簇之中上面的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon以此类推大写字母秩检测

示意图3 与肥胖症献血者相比，方面加速者遗忘treg的GITR减低。每个遗忘CD4+T线粒质元簇(遗忘T线粒质_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T线粒质;HLA-DR + GITR +遗忘T线粒质;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个隐含上面的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的隐含热示意图(sp606不以外在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇之中所有HD(红色)、所有SP(紫色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR隐含串联，标示出有直方示意图(c)和综合示意图(d)。Wilcoxon以此类推大写字母秩和检测，p< 0.07(红色)所有酪氨酸以外，p< 0.05(紫色)酪氨酸SP 606和比如说的HD不以外在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR隐含，从国际标准门控，从所有HD(红色)、所有SP(紫色)和SP 606(红色)串联，标示出有直方示意图(e)和综合示意图(f) *p< 0.05, Wilcoxon以此类推大写字母秩检测

示意图4 来自加速方面的CD4+ treg线粒质控制效不应CD4+T线粒质的意志力降低。SP四组用紫色的直通和带子坚称，HD四组用紫色的直通和带子坚称，红色的直通/带子坚称酪氨酸sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T线粒质展开分选。CD4+CD25−(不应答者)被上面为CFSE, Treg按观察的%滴定。用抗CD3 /28微珠转化线粒质，养成3天后展开流式线粒质拳法检测。(a-d)与CD4+不应答者相对不应的treg养成(骨髓)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD不应答者养成。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE诱导百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱导百分比。用于无患者对照(诱导的响不应线粒质则有treg)近似值诱导百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

示意图5 效不应CD4+T线粒质对加速方面的T线粒质转化的诱导非常敏感。SP四组用紫色的直通和带子坚称，HD四组用紫色的直通和带子坚称，红色的直通/带子坚称酪氨酸sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T线粒质展开分选。CD4+CD25−(不应答者)被cfsel上面，treg按观察的%滴定。用抗CD3 /28微珠转化线粒质，养成3天后展开流式线粒质拳法(CD25反染)和线粒质因子比对。HD Treg与HD、SP或sp606不应答者共同养成。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE诱导花红(b)。(c,d) CD25诱导花红(c)和CD134诱导花红(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成之中的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们得出有的论点是，来自加速方面子的转化遗忘CD4+Treg在GITR隐含之中给予了扩展和丰富，强调了进一步深入研究Treg在1标准型癌症安全性形态之中的异质性的有效性。

原文中有：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28